高致病性猪蓝耳病病毒试剂盒使用步骤

高致病性猪蓝耳病病毒（PRRSV-M）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）

高致病性猪蓝耳病病毒（PRRSV-M）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）中含有聚合酶链式反应所需要各种试剂组分，如：引物、dNTPs、缓冲液、Taq酶等，PCR反应液混合液中加入检测样品，即可进行PCR扩增反应。PCR扩增产物经琼脂糖电泳染色判断，阳性样本将在相应大小的片段处出现特异性条带。

规格： 50T/100T

分类：pcr-荧光试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光，快递免费送货上门。

高致病性猪蓝耳病病毒（PRRSV-M）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

需要注意什么：

PCR反应液请在冰中配制，然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法（Cool Start Method）与热启动法（Hot Start Method）相结合，更能有效地减少PCR过程中的非特异性反应，增强PCR扩增的特异性，能得到良好的PCR结果。

PCR的反应条件：

因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。

◇ 循环次数

根据模板DNA的量以及扩增片段的大小，设定25～30个循环。

如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，则会出现Smear。

◇ Anneal以及Extension

合适的Anneal温度通常在45～68℃之间 (预备实验可2℃间隔进行)。另外，由于在60～68℃间，也有很高的活性, 因此可在此温度范围内设定Anneal-Extension温度, 进行2 Step PCR。Anneal-Extension温度为68℃ 时，每kbp大体可设定30秒～1分钟；当温度设定在68℃以下时, 时间设定可稍长一些。通常，Anneal温度太高，有时会得不到扩增产物；Anneal温度太低时，容易发生非特异性反应。另外，Extension时间太短时，会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成；而Extension时间太长时，会出现Smear。