口蹄疫A型抗体快速检测卡采用夹心法设计。将胶体金颗粒标记的纯化口蹄疫病毒O型抗原1喷吐于结合垫上,干燥备用。而将纯化的口蹄疫病毒O型抗原2和口蹄疫病毒O型抗体IgG调整至工作浓度,分别喷涂于NC膜的检测带(T)和质控带(C)上。稀释好的样品血清从样品垫流向金标成品膜。样品中所含的抗体会在检测带的位置上与标记的抗原结合发生相应的反应。质控带上发生的反应用以确定试纸条上液体正确的流向。
一、口蹄疫A型抗体快速检测卡试验方法:
1.撕开检测卡铝箔包装袋,取出检测卡,放于平整、洁净的台面上。
2.用配套吸管吸取已准备好的澄清样本上清液,垂直而缓慢的滴加2-3滴(约60ul)到加样孔内。(全血样本须4滴以上)
3.室温下放置10-20分钟判断结果,超过30分钟的结果无效。
二、口蹄疫A型抗体快速检测卡操作步骤:
取预包被的检测板(根据样品多少,可拆开分次使用),将稀释好的待检血清取100μl加入到检测板孔中。同时设阴性对照和阳性对照各2孔,取阴性及阳性对照各100μl分别加入反应孔中轻轻振匀孔中样品(勿溢出)。
盖上封板膜(可按实际需要自行裁剪),置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作浓度洗涤液每孔加250ul,后甩去孔内液体,以上步骤重复4-6次,后在干净吸水纸上拍干。
每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤4-6次, 方法同3。切记后在干净吸水纸上拍干。
每孔加显色液100?l,轻微震荡混匀、盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。
每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。
三、口蹄疫A型抗体快速检测卡结果判断:
1.阴性:在观察孔内,只有对照线区(C)出现一条紫红色线。
2.阳性:在观察孔内,检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线。