一、基础原理
样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,样品中的有机氮(如蛋白质)转化为氨与硫酸结合成硫酸铵;然后在碱性条件下蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收;再用标准盐酸滴定。最后根据消耗的标准盐酸的量计算出蛋白质的含量。
二、消化
浓硫酸具有脱水性,使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮。
2NH3(CH2)2COOH+13H2SO4=(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O
浓硫酸又具有氧化性,将有机物炭化后的碳化为二氧化碳,硫酸则被还原成二氧化硫。
2H2SO4+C=2SO2+2H2O+CO2
二氧化硫使氮还原为氨,本身则被氧化为三氧化硫,氨随之与硫酸作用生成硫酸铵留在酸性溶液中。
H2SO4+2NH3=(NH4)2SO4
三、蒸馏
在消化*的样品溶液中加入浓氢氧化钠使呈碱性,加热蒸馏,即可释放出氨气,反应方程式如下:
2NaOH+(NH4)2SO4=2NH3(气体)+Na2SO4+2H2O
四、吸收
加热蒸馏所放出的氨,用硼酸溶液进行吸收。
2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O
五、滴定
用盐酸标准溶液滴定,因硼酸呈微弱酸性(k=5.8×10-10),用酸滴定不影响指示剂的变色反应,滴定的反应方程式如下:
(NH4)2B4O7+2HCL+5H2O=2NH4CL+4H3BO3
